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📋 常用抗生素工作浓度表

大肠杆菌常规克隆的抗生素参考终浓度与储备液示例，区分载体选择标记和宿主背景，并附一手来源。

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参考说明

适用范围

本表采用 Addgene 的常规 LB 培养参考值，用于核对大肠杆菌质粒克隆的筛选条件，不是所有菌株、培养基和产品的统一配方。使用前先确认载体注明的抗性标记、宿主背景和具体产品说明。来源 1

DH5α、BL21 等菌株名称本身不能说明已经携带某种质粒抗性；应分别核对宿主基因型和载体上的选择标记。

大肠杆菌常规克隆参考表

工作终浓度指加入培养基后的浓度；储备液是加药前的母液。下列两列单位分别为 μg/mL 和 mg/mL，不能直接互换。储备液数值采用 Addgene 倒板协议的 1000× 示例，实际配制仍应核对所用试剂的溶剂与产品要求。来源 2

窄屏可左右滑动表格；也可聚焦表格后使用左右方向键。

抗生素 缩写 工作终浓度 储备液示例（1000×） 配制与使用提示 来源
Ampicillin Amp 100 μg/mL 100 mg/mL 核对载体选择标记和产品说明 1 / 2
Carbenicillin Carb 100 μg/mL 100 mg/mL Addgene 列为 Amp 的替代选项，先核对载体说明 1 / 2
Kanamycin Kan 50 μg/mL 50 mg/mL 按所用产品说明配制和保存 1 / 2
Chloramphenicol Cm 25 μg/mL 25 mg/mL 该倒板协议采用乙醇配制储备液 1 / 2
Tetracycline Tet 10 μg/mL 10 mg/mL 按具体产品要求核对溶剂、避光和保存条件 1 / 2
Spectinomycin Spec 50 μg/mL 50 mg/mL 核对载体选择标记和产品说明 1 / 2
Gentamicin Gen 10 μg/mL 10 mg/mL 按具体产品与载体说明核对选择条件 1 / 2

Blasticidin 不能混用细菌与哺乳细胞条件

Blasticidin 不列入上面的常规 LB 表。Thermo Fisher 的 R21001 产品说明书第 3 页，在大肠杆菌筛选段落给出 50–100 μg/mL 和指定的 Low Salt LB；该段附注要求培养基保持低盐、pH 不高于 7.0。哺乳细胞的参考范围为 2–10 μg/mL，需按细胞系测定敏感性。不能把细菌用量直接套到哺乳细胞，也不能忽略培养基条件。来源 3，第 3 页

配制与保存时核对什么

  • 抗生素的无菌处理、加药温度、溶剂、保存温度和有效期，以具体货号说明书及已验证的实验室 SOP 为准；本页不指定统一的保存月数。
  • Addgene 倒板协议将培养基灭菌与后续加抗生素分开，并要求核对厂家允许的加药温度。具体产品能否高压处理、是否需要过滤除菌，应分别查其说明书。来源 2
  • 诱导表达等条件改变时，以对应载体、宿主和表达体系的说明为准，不按菌体密度自行提高用量。
  • Addgene 说明 Carbenicillin 相比 Ampicillin 更稳定，可能减少卫星菌落；这不等于可以自行推断其耐热、耐酸或通用保存期限。来源 2

来源与适用边界

  1. Addgene：Inoculating a Liquid Bacterial Culture——LB 培养参考终浓度、抗生素与质粒抗性匹配。
  2. Addgene：Pouring LB Agar Plates——工作浓度与 1000× 储备液的区分、Chloramphenicol 溶剂示例及加药注意。
  3. Thermo Fisher：Blasticidin S HCl，R21001，MAN0001536 Rev. A.0——特定产品的细菌与哺乳细胞条件；其他货号应重新核对。

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