缓冲液 / 上样设置不当
旧 buffer、倍数配错或 loading buffer 比例不合适,都会让条带表现变差。
围绕无条带、条带弥散、胶浓度与缓冲液设置,建立核酸电泳的基础排查与操作指南。
核酸电泳专题聚焦最常见的基础操作问题,帮助把”无条带”和”条带异常”快速拆成可验证的几个检查点。
旧 buffer、倍数配错或 loading buffer 比例不合适,都会让条带表现变差。
电泳无条带可能来自 PCR 无产物,也可能来自上样、染料、缓冲液或跑胶条件问题。
样品盐离子过高、胶浓度不合适或上样过量时,条带最容易出现弥散和拖尾。
条带出现微笑形或皱眉形弯曲,通常与胶浓度不均、电压过高或冷却不均有关。
同一泳道内条带亮度分布不均匀,可能提示样品局部降解或上样操作问题。