样品定量与上样

📏 样品上样量计算

根据目标上样质量或体积,快速反推样品与 loading buffer 的加入量。

样品浓度目标上样量Loading buffer 比例

在线计算

按字段标注的单位输入数值;序列类工具仅支持 `A / T / C / G`。

计算结果
样品体积 5 µL,loading buffer 1 µL,总体积 6 µL。

工具说明

适用场景

样品上样量计算适合 DNA 凝胶、电泳前样品准备、蛋白上样和与 loading buffer 的比例换算。

输入说明

  • 样品浓度:当前样品浓度
  • 目标上样量:希望最终上样的质量
  • Loading buffer 比例:如

计算逻辑

页面会先反推达到目标质量所需的样品体积,再根据 loading buffer 倍数计算应补多少 buffer 和最终总体积。

计算公式

样品体积:

样品体积 = 目标上样量 ÷ 样品浓度

Loading buffer 体积:

Loading buffer 体积 = 样品体积 ÷ (buffer 倍数 - 1)

最终总体积:

总体积 = 样品体积 + Loading buffer 体积

示例

如果你希望上样 500 ng DNA,样品浓度是 100 ng/µL,并使用 6× loading buffer,就能快速得到样品体积和 buffer 体积。

注意事项

  • 对比较实验结果的项目,尽量让每个泳道上样量一致
  • 如果样品体积过大,需要先重新浓缩样品,而不是一味增加泳道体积

常见错误

  • 把目标上样量和目标上样体积混在一起
  • 忘记 loading buffer 也会增加最终上样体积
  • 样品浓度单位不一致,比如把 µg/µL 当成 ng/µL 输入
  • 泳道体积有限时仍强行增加样品体积,导致条带拖尾或扩散

常见问题 FAQ

样品体积算出来太大怎么办?

先不要直接把全部体积加进泳道。可以考虑浓缩样品、降低目标上样量,或者重新评估胶孔容量。若正在排查“PCR 没有条带”,也要同步确认模板本身是否真的有产物。

DNA 凝胶和蛋白电泳能用同一个公式吗?

体积换算逻辑类似,但上样目标不同。DNA 常按 ng 或条带观察需求控制,蛋白常按 µg 控制,且 buffer 配方、变性条件和泳道容量不同。

上样量一致,条带强度还是不一致正常吗?

不一定说明计算错了。样品纯度、染料结合、扩增产物长度、蛋白转膜效率都会影响最终信号,可以结合 核酸电泳条带弥散 或 Western blot 相关排查继续判断。

常用模板

  • DNA 凝胶上样
  • 蛋白电泳上样