BioHelper
可以问实验排错、实验计算,也可以让我基于站内内容查找资料并给出引用。
根据目标上样质量或体积,快速反推样品与 loading buffer 的加入量。
按字段标注的单位输入数值;序列类工具仅支持 `A / T / C / G`。
样品上样量计算适合 DNA 凝胶、电泳前样品准备、蛋白上样和与 loading buffer 的比例换算。
6×页面会先反推达到目标质量所需的样品体积,再根据 loading buffer 倍数计算应补多少 buffer 和最终总体积。
样品体积:
样品体积 = 目标上样量 ÷ 样品浓度
Loading buffer 体积:
Loading buffer 体积 = 样品体积 ÷ (buffer 倍数 - 1)
最终总体积:
总体积 = 样品体积 + Loading buffer 体积
如果你希望上样 500 ng DNA,样品浓度是 100 ng/µL,并使用 6× loading buffer,就能快速得到样品体积和 buffer 体积。
µg/µL 当成 ng/µL 输入先不要直接把全部体积加进泳道。可以考虑浓缩样品、降低目标上样量,或者重新评估胶孔容量。若正在排查“PCR 没有条带”,也要同步确认模板本身是否真的有产物。
体积换算逻辑类似,但上样目标不同。DNA 常按 ng 或条带观察需求控制,蛋白常按 µg 控制,且 buffer 配方、变性条件和泳道容量不同。
不一定说明计算错了。样品纯度、染料结合、扩增产物长度、蛋白转膜效率都会影响最终信号,可以结合 核酸电泳条带弥散 或 Western blot 相关排查继续判断。
凝胶电泳中 DNA 条带不清晰,呈现拖尾或弥散状,无法准确判断片段大小。
旧 buffer、倍数配错或 loading buffer 比例不合适,都会让条带表现变差。
加样后孔中看不到样品或样品量很少,可能是加样操作或样品问题导致。
DNA marker 条带模糊或拖尾,影响分子量判断的准确性。
Marker 正常而样品弥散,多数说明跑胶系统基本可用,应优先回到样品质量和上样条件。
DNA Marker 条带出现异常,如条带模糊、扩散或位置不准确,影响片段大小判断。
如果当前工具没有覆盖你的参数、样品类型或异常现象,可以把具体实验条件发过来,后续优先补成模板或排查页。