🧬 PCR 反应体系计算

适用场景

这个工具用于配置常规 PCR 或 qPCR 反应体系，尤其适合 20 µL、25 µL、50 µL 这类高频体系。
当你想快速核对 buffer、引物、模板和酶的加入体积时，它比手动算更省错。

输入说明

• 目标总体积：单个反应孔或单个反应管的终体积
• buffer 倍数：储备液和目标工作倍数
• 模板体积：单孔加入的模板量
• 其他体积：引物、dNTP、酶等按实际加入量填写

计算逻辑

页面会先根据 buffer 倍数反推 buffer 用量，再把各组分总和从总体系体积中扣除，自动得到补水体积。

示例

配置 20 µL PCR 体系 时，可以快速得到：

• 10× buffer 应加多少
• 正反向引物各加多少
• dNTP、模板和酶的标准体积
• 最终补水量

注意事项

• 如果结果提示“组分体积之和已超过总体系”，说明总体积设得过小或某组分填得过大
• 多孔板批量配制时，请额外乘上孔数并预留 5%-10% 损耗

常见问题 FAQ

PCR 体系里补水量为什么总是算出来不一样？

因为补水量本来就是由其它组分体积反推得到的。模板、引物、酶和 buffer 中任何一个参数变化，补水体积都会变化。

做 20 µL 和 50 µL 体系时，引物和模板一定按比例放大吗？

多数情况下是按比例放大，但前提是目标终浓度和模板输入策略不变。若你正遇到 PCR 条带很淡 或 PCR 没有条带，不要只放大体积而不重新检查浓度设计。

为什么体系算对了，实验还是失败？

体系计算只能保证体积关系正确，不能替代引物设计、模板质量和程序优化。建议结合 引物退火温度计算 和对应排查文章一起看。