问题库

PCR 加样后没有条带但 Marker 正常怎么办

Marker 正常说明跑胶系统大概率没问题,应优先回到模板、引物、体系和循环条件。

PCR / qPCR 无结果 / 信号弱 6.8 次关注
链接已复制到剪贴板
PCR 加样后没有条带但 Marker 正常怎么办
快速判断

先确认这 4 件事

最可能原因

Marker 正常说明跑胶和显影基本可用,应回到 PCR 扩增端排查。

怎么确认

先检查阳性对照、模板质量、引物有效性和循环条件,而不是继续改跑胶时间。

立刻处理

用阳性模板或已验证引物做对照,同时复核退火温度、Mg2+、酶和模板加入量。

下次避免

每次新体系都保留阳性对照和空白对照,便于区分扩增失败和电泳问题。

继续阅读

查看完整排查文章

推荐工具

用工具复核关键参数

引物退火温度计算

帮助估算引物退火温度,并结合异常现象给出优化方向。

立即使用
稀释计算器

根据 C1V1=C2V2 快速计算原液体积、稀释液体积和最终倍数。

立即使用
PCR 反应体系计算

快速计算 PCR 反应体系中的 buffer、引物、模板和酶体积。

立即使用
本页用于科研实验现象排查,不替代实验室 SOP、试剂说明书或医学判断。