Western blot 条带分子量和预期不符怎么办

先确认偏差有多大

如果条带位置只偏差少量，先怀疑 marker 判读和跑胶条件。
如果偏差非常明显，再考虑样品剪切、蛋白修饰、抗体识别异构体等更深层原因。

最常见的几种情况

1. Marker 选择或判读不合适
2. 蛋白发生糖基化、磷酸化等修饰
3. 样品降解后出现较小片段
4. 抗体识别了相近家族蛋白或异构体

排查动作

优先查阅目标蛋白已知的理论分子量范围、剪接体和修饰信息。
同时检查胶浓度是否让目标分子量区间分辨率足够。
如果样品复杂，最好增加阳性对照或已知分子量标准样品。

实用建议

不要仅凭“位置不对”就直接弃用抗体。
先结合文献、数据库和样品背景判断，再决定是否更换抗体或重新设计实验。