实验排错

稳转株筛选失败怎么办?

稳转株筛选三大失败模式:加药全死、加药全活筛不出来、筛到假阳性不表达,分别指向加药时机、浓度、质粒结构。

转染效率低
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稳转株筛选失败
快速判断

先确认这 4 件事

以下为通用核查起点,不能据此确定原因;请结合下方正文、必要对照和原实验 SOP 判断。

先排查的方向

先确认现象及其出现范围,不要只凭这一条描述归因。

怎么确认

对照同批样本、适用的阳性或阴性对照,以及原始实验记录,找出最早出现差异的步骤。

下一步

记录关键条件,阅读下方与该现象相关的正文,再按所用试剂和设备的原实验 SOP 逐项核查。

下次避免

保留异常现象、批次和处理记录,以便复核与后续比较。

先做抗生素 kill curve + 完整 5 个对照孔(空白/未转染加药/空转/阳性稳转对照/空载体),再分三大失败模式排查。

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本页用于科研实验现象排查,不替代实验室 SOP、试剂说明书或医学判断。