根据 OD260 吸光度值和比色皿光径,快速换算 DNA / RNA 浓度(ng/µL),并给出纯度比值判断。
按字段标注的单位输入数值;序列类工具仅支持 `A / T / C / G`。
用紫外分光光度计测定核酸浓度后,需要将 OD260 值换算为实际 ng/µL 浓度。
这个工具支持 dsDNA、ssDNA、RNA 三种类型,同时计算 OD260/OD280 和 OD260/OD230 纯度比值。
浓度(ng/µL) = OD260 × 消光系数 × 光径(cm)
消光系数:
测得 dsDNA 的 OD260 = 0.25,光径 1 cm,则浓度 = 0.25 × 50 × 1 = 12.5 ng/µL。
比值低于 1.8 通常提示蛋白质污染。可以先用酚氯仿抽提或柱纯化去除蛋白,再重新测定。
常见原因是异硫氰酸胍、β-巯基乙醇(RNA 提取试剂残留)或碳水化合物污染。建议做乙醇沉淀或柱纯化。
NanoDrop 使用 1–2 µL 样品,光径通常为 1 cm,但不需要比色皿。读数差异可能来自样品均匀性、气泡或基线校准。建议同一批样品用同一台仪器测定。
慢病毒感染效率低通常由病毒滴度不足、包装细胞转染效率差、Polybrene 未加或 MOI 太低引起。
脂质体转染后细胞大量漂浮死亡或脱壁,常由试剂比例过高、质粒内毒素、细胞状态差或抗生素加药过早引起。
在同一反应管中进行多个基因的扩增时,部分基因信号明显减弱或完全消失。
某些 DNA 模板具有复杂的二级结构,需要添加 DMSO 等添加剂才能正常扩增,但效果不稳定。
qPCR 无扩增或 PCR 无条带,多由模板、引物、体系或程序造成。
转染用质粒内毒素超标、超螺旋比例不足、盐/RNA残留都会导致效率低、重复差和细胞毒性大。
如果当前工具没有覆盖你的参数、样品类型或异常现象,可以把具体实验条件发过来,后续优先补成模板或排查页。