快速判断
先确认这 4 件事
最可能原因
转染用质粒内毒素超标、超螺旋比例不足、盐/RNA残留都会导致效率低、重复差和细胞毒性大。 先从最容易验证的对照和关键步骤开始排查。
怎么确认
比较正常对照、异常样本和重复孔，确认异常是单点问题还是整批问题。
立刻处理
先用最小改动复现实验，逐项替换样本、试剂、仪器设置或操作条件。
下次避免
把异常现象、批次、关键参数和处理方式记录下来，方便下次快速定位。
按 OD 比值（A260/280 1.80–1.95、A260/230 >2.0）、琼脂糖凝胶看超螺旋比例（>80%）、内毒素水平（<1 EU/μg）三步放行。
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本页用于科研实验现象排查，不替代实验室 SOP、试剂说明书或医学判断。