实验排错

无结果 / 信号弱怎么办?

qPCR 无扩增或 PCR 无条带,多由模板、引物、体系或程序造成。

PCR / qPCR无结果 / 信号弱
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无结果 / 信号弱
快速判断

先确认这 4 件事

以下为通用核查起点,不能据此确定原因;请结合下方正文、必要对照和原实验 SOP 判断。

先排查的方向

先确认现象及其出现范围,不要只凭这一条描述归因。

怎么确认

对照同批样本、适用的阳性或阴性对照,以及原始实验记录,找出最早出现差异的步骤。

下一步

记录关键条件,阅读下方与该现象相关的正文,再按所用试剂和设备的原实验 SOP 逐项核查。

下次避免

保留异常现象、批次和处理记录,以便复核与后续比较。

从现象开始

逐步检查,再决定下一步

从电泳检测、模板、引物、体系和程序五个角度,快速缩小 PCR 无条带问题范围。

开始排查

从模板、引物、程序和电泳 4 个方向快速排查。

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推荐工具

用工具复核关键参数

引物退火温度计算

帮助估算引物退火温度,并结合异常现象给出优化方向。

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稀释计算器

根据 C1V1=C2V2 快速计算原液体积、稀释液体积和最终倍数。

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PCR 反应体系计算

快速计算 PCR 反应体系中的 buffer、引物、模板和酶体积。

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引物基础检查

计算单条引物的长度、GC 含量和简化 Tm;不分析二聚体、发卡或特异性。

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C1V1=C2V2 反向求解

已知一项浓度、总体积与原液体积时,反向推算原液浓度或目标浓度。

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系列稀释计算

根据起始浓度、稀释倍数和步数,快速生成系列稀释方案。

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质量浓度与体积换算

在 ng/µL、µg/mL、mg/mL 和总体积之间进行常用实验换算。

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本页用于科研实验现象排查,不替代实验室 SOP、试剂说明书或医学判断。