什么是 OD 值：核酸定量术语解释

OD 值是什么

OD 值（Optical Density，光密度）又称吸光度（Absorbance, A），是样品对特定波长光的吸收程度的对数度量，定义为 A = −log₁₀(I/I₀)，其中 I₀ 是入射光强度，I 是透过光强度。在核酸实验中常用 260 nm 波长测 OD₂₆₀，反映核酸浓度；同时测 280 nm、230 nm 波长得到 OD₂₆₀/₂₈₀、OD₂₆₀/₂₃₀ 比值，反映纯度。

为什么 OD 值重要

OD 值是 Nanodrop、酶标仪、分光光度计读数的原始数据，所有浓度换算都基于它。根据朗伯-比尔定律，OD 与浓度线性相关：浓度 = OD × 换算系数（dsDNA 50、ssDNA 33、RNA 40 µg/mL per OD）。OD₂₆₀/₂₈₀ < 1.7 提示蛋白或酚类污染，OD₂₆₀/₂₃₀ < 1.8 提示胍盐、有机溶剂残留，这两个比值是判断核酸样品能否进入下游实验的”门槛指标”。

常见误区

1. 只看浓度不看纯度：OD₂₆₀ 出 0.5、浓度看着正常，但 260/230 只有 1.2，下游 PCR 会被胍盐严重抑制。
2. OD > 2.0 还直接信：超出线性区需稀释 5–10 倍重测，否则浓度被低估。
3. 340 nm 基线不归零：散射型污染（颗粒物）会让基线抬高，浓度虚高，需先离心或纯化。
4. 不分 dsDNA / ssDNA / RNA 系数：用 dsDNA 50 系数算 RNA 浓度，结果会被低估约 20%。

相关工具

• OD260 浓度计算器：输入 OD、光径、样品类型，立即得到浓度。
• 摩尔浓度换算器：ng/µL 与 nmol/L 互转。

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