术语解释

什么是 SDS-PAGE：蛋白质电泳术语解释

SDS-PAGE 是带负电的 SDS-蛋白复合物在聚丙烯酰胺凝胶中按分子量分离的电泳技术，是 Western blot 前的标配步骤。

更新于 2026-09-04 1 分钟

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SDS-PAGE 是什么

SDS-PAGE（Sodium Dodecyl Sulfate–Polyacrylamide Gel Electrophoresis，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳）是将蛋白质样品与 SDS 结合形成带负电的棒状复合物，在聚丙烯酰胺凝胶中按分子量大小进行分离的电泳技术。SDS 让所有蛋白带近似恒定的电荷密度，分离完全由分子筛效应决定，迁移距离与 log(分子量) 成线性关系，故可通过 Marker 估算蛋白分子量。

为什么 SDS-PAGE 重要

它是蛋白质研究中最基础、最常用的分离手段。在 Western blot 中是转膜前的”标配前置步骤”，也是蛋白纯度、表达量、分子量鉴定的首选方法。凝胶浓度决定分离范围：10% 凝胶适合 30–200 kDa，12% 适合 20–80 kDa，15% 适合 10–40 kDa，小蛋白（<15 kDa）建议用 Tricine-SDS-PAGE 或 16% 以上胶。

常见误区

上样量过大：条带弥散、拖尾、Marker 失真，建议总蛋白 20–40 µg / 孔。
不上样缓冲液直接煮：SDS、β-巯基乙醇（或 DTT）+ 95 ℃ 加热 5 min 是变性标准流程，省任一步都会导致条带异常。
浓缩胶跑过长：浓缩胶目的是压缩样品成薄层，时间过长反而扩散，进入分离胶后立即调高电压。
小蛋白跑常规胶：<15 kDa 蛋白在 12% 胶中跑不下来，应改用 Tricine 系统。

相关工具

上样量计算器：根据浓度算上样体积。
摩尔浓度换算器：mg/mL 与 µmol/L 互转。

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样品上样量计算

根据目标上样质量或体积，快速反推样品与 loading buffer 的加入量。

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本文用于科研实验排查与条件优化，不替代实验室 SOP、试剂说明书或医学判断。