先看是不是上样差异
条带亮度不均最常见的原因不是“扩增效率不同”,而是样品浓度本来就不一致或移液误差大。
如果同一批次中强弱差异非常大,先回到定量和上样动作本身。
常见原因
- 样品浓度未统一
- 上样前未充分混匀
- loading buffer 比例不一致
- 样品中含盐或杂质不同
排查顺序
- 重新定量样品
- 统一稀释到相近浓度
- 每次加样前轻弹混匀
- 保持同一批 loading buffer 配置
优化建议
对于需要比较条带强弱的实验,不要依赖“估着上样”。
最好在定量后统一换算体积,并在实验记录里写清实际加入量,后续复现会轻松很多。
相关工具
继续用工具完成条件判断和计算
本文用于科研实验排查与条件优化,不替代实验室 SOP、试剂说明书或医学判断。