🧫 DNA/RNA 拷贝数计算

适用场景

DNA/RNA 拷贝数计算常用于 qPCR 标准品准备、质粒模板估算、体外转录 RNA 定量和核酸输入量核对。

输入说明

• 核酸长度：片段或模板长度
• 样品浓度：当前浓度
• 样品体积：实际使用体积
• 分子类型：双链 DNA 或单链 RNA

计算公式

页面会根据长度估算分子量，再按阿伏伽德罗常数换算总分子数：

拷贝数 = 质量(g) × 6.022×10²³ ÷ 分子量(Da)

示例

做 qPCR 标准曲线时，可以先估算某个质粒或 RNA 转录产物在当前体积中大约有多少拷贝，再决定后续稀释方案。

注意事项

• 长度和分子类型必须对应
• 结果是理论估算值，前提是样品纯度和浓度测定可靠
• 如果存在明显降解，理论拷贝数和实际有效拷贝数会偏离

常见问题 FAQ

DNA/RNA 拷贝数和 ng/µL 为什么不能直接互换理解？

因为拷贝数不仅和质量有关，还和分子长度、单双链类型有关。同样的质量，不同长度的分子拷贝数会差很多。

做 qPCR 标准品时，为什么先算拷贝数再做梯度？

因为标准曲线本质上是已知输入量的梯度。若只按质量梯度配，不一定能准确对应到理论拷贝数。

结果显示拷贝数很高，但 Ct 还是偏高，为什么？

这通常提示理论浓度和实际有效模板不一致，可能与模板降解、抑制物或定量误差有关。可以结合 qPCR Ct 值偏高一般先查什么 一起看。