PCR 添加剂的作用依赖酶、缓冲液和模板;本页不提供跨产品通用的 DMSO/Betaine/Mg²⁺ 叠加配方。先记下所用酶或 Master Mix 的完整货号,再决定是否按该产品说明评估添加剂。
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| 体系或问题 | 需要核对的内容 | 官方入口 |
|---|---|---|
| NEB Q5 High-Fidelity DNA Polymerase M0491 | Q5 High GC Enhancer 是针对该体系的补充试剂;查适用模板与配套缓冲液,不能视为单独缓冲液 | M0491 PCR 方案 |
| Q5 配方/版本不同 | M0491、M0493、Q5-XT 等产品不是同一配方;添加剂条件要匹配产品 | NEB:何时使用 Q5 High GC Enhancer |
| Mg²⁺ / dNTP | 先查预混液已含组分与最终浓度;不要把额外添加量当最终总量 | 对应酶手册的组成表;E0555 手册是一个具体套装示例 |
| DMSO / Betaine / BSA 等 | 记录产品是否支持、允许范围、目标效果和对照;未找到对应说明时不使用本站的通用百分比 | NEB:GC-rich 扩增影响因素 |
母液已知且同一量纲时,添加体积 = 目标终浓度 × 反应终体积 ÷ 母液浓度。体积分数同理:纯算术示例中,50 µL 的体系里 2%(v/v)对应 1 µL;这不是对某种添加剂的推荐浓度。添加体积要从补水中扣除,反应终体积保持不变。
对照记录至少包括酶/缓冲液货号、模板、引物、添加剂母液、最终浓度、反应体积与循环条件。一次比较中保留无添加对照,区分“扩增有变化”和“该添加剂解决了原因”。
无条带、多条带和二聚体不一定源于添加剂;先结合非特异条带排查整理现象。添加剂组合、调温和加量都需要对应产品与实验对照支持。
Q5 的具体主张对应上述 NEB 指定产品方案/FAQ;GC-rich 视频支持效果取决于体系和模板,不提供统一成功保证。核对日期:2026-11-04。
如果当前工具没有覆盖你的参数、样品类型或异常现象,可以把具体实验条件发过来,后续优先补成模板或排查页。