引物二聚体如何判断与优化

从模板、引物、反应体系、程序和电泳五个角度，快速排查 PCR 无条带问题。

双峰通常意味着非特异扩增或引物二聚体，需要结合对照、Tm 和引物结构综合判断。

长片段 PCR 扩增失败时，优先检查模板完整性、聚合酶体系、延伸时间、引物设计和反应抑制，而不是只提高循环数。

当阴性对照也扩增、重复出现异常阳性时，往往是体系污染、分区不清或气溶胶残留所致。