引物二聚体如何判断与优化

什么是引物二聚体

引物二聚体是引物之间互补配对并被聚合酶扩增形成的短产物，常见于 qPCR、低模板浓度或引物浓度偏高的场景。

如何识别

• 熔解曲线出现低温小峰
• 阴性对照出现扩增
• 电泳底部出现短小条带

如何优化

• 降低引物浓度
• 提高退火温度
• 重新检查 3’ 端互补性
• 重新设计引物