排查向导

核酸电泳条带弥散排查向导

围绕样品质量、上样量、胶浓度、缓冲液和跑胶电压,快速定位核酸电泳条带弥散问题。

样品条带发散拖尾明显Marker 正常但样品泳道异常

适用场景

遇到以下现象时,建议按下面的排查顺序逐步缩小范围,而不是一次性同时调整多个变量。

  • 样品条带发散
  • 拖尾明显
  • Marker 正常但样品泳道异常
01

先看 Marker 和阳性样品是否正常

Marker 是否清楚?阳性样品是否也弥散?

如果正常

如果 Marker 正常,优先检查样品本身和上样条件。

如果异常

如果 Marker 也异常,先回到胶、缓冲液和电压设置。

可能原因

  • 缓冲液错误
  • 胶配置问题
  • 电压异常

推荐处理方式

  • 换新缓冲液
  • 重配胶
  • 核对电压设置
02

检查样品质量和纯度

样品是否降解、是否有盐和杂质残留?

如果正常

样品质量基本正常时,再看上样量和胶条件。

如果异常

降解、高盐或蛋白残留都容易造成弥散和拖尾。

可能原因

  • 降解
  • 高盐
  • 残留杂质

推荐处理方式

  • 重新纯化样品
  • 必要时重提
  • 减少冻融次数
03

确认上样量和 loading buffer

上样量是否过高?loading buffer 比例是否正确?

如果正常

上样条件合理时,再看胶浓度和跑胶速度。

如果异常

上样过多或 buffer 配比不对,也会让泳道发散。

可能原因

  • 上样量过高
  • buffer 配比错误
  • 混匀不充分

推荐处理方式

  • 降低上样量
  • 重配 loading buffer
  • 重新混匀后上样
04

检查胶浓度和跑胶电压

胶浓度是否匹配片段大小?电压是否过高?

如果正常

如果这些都合理,问题多半来自样品本身。

如果异常

胶浓度不合适或电压过高会放大条带弥散。

可能原因

  • 胶浓度不匹配
  • 电压过高
  • 跑胶时间过长

推荐处理方式

  • 调整胶浓度
  • 降低电压
  • 缩短跑胶时间

复制排查清单

勾选已经完成的步骤后,可以复制一份文字版排查记录,用于实验记录或发给同事复核。

排查清单预览