如果 Marker 正常,优先检查样品本身和上样条件。
适用场景
遇到以下现象时,建议按下面的排查顺序逐步缩小范围,而不是一次性同时调整多个变量。
- 样品条带发散
- 拖尾明显
- Marker 正常但样品泳道异常
01
先看 Marker 和阳性样品是否正常
Marker 是否清楚?阳性样品是否也弥散?
如果 Marker 也异常,先回到胶、缓冲液和电压设置。
可能原因
- 缓冲液错误
- 胶配置问题
- 电压异常
推荐处理方式
- 换新缓冲液
- 重配胶
- 核对电压设置
02
检查样品质量和纯度
样品是否降解、是否有盐和杂质残留?
样品质量基本正常时,再看上样量和胶条件。
降解、高盐或蛋白残留都容易造成弥散和拖尾。
可能原因
- 降解
- 高盐
- 残留杂质
推荐处理方式
- 重新纯化样品
- 必要时重提
- 减少冻融次数
03
确认上样量和 loading buffer
上样量是否过高?loading buffer 比例是否正确?
上样条件合理时,再看胶浓度和跑胶速度。
上样过多或 buffer 配比不对,也会让泳道发散。
可能原因
- 上样量过高
- buffer 配比错误
- 混匀不充分
推荐处理方式
- 降低上样量
- 重配 loading buffer
- 重新混匀后上样
04
检查胶浓度和跑胶电压
胶浓度是否匹配片段大小?电压是否过高?
如果这些都合理,问题多半来自样品本身。
胶浓度不合适或电压过高会放大条带弥散。
可能原因
- 胶浓度不匹配
- 电压过高
- 跑胶时间过长
推荐处理方式
- 调整胶浓度
- 降低电压
- 缩短跑胶时间
复制排查清单
勾选已经完成的步骤后,可以复制一份文字版排查记录,用于实验记录或发给同事复核。
排查清单预览