先把单位关系捋清楚
mg/mL 是质量浓度,mM 是摩尔浓度。两者不能直接互换,中间必须经过分子量。
常用关系是:
质量 mg = 浓度 mM × 分子量 g/mol × 体积 mL ÷ 1000
反过来,如果已经知道质量浓度:
浓度 mM = mg/mL × 1000 ÷ 分子量 g/mol
这个换算看起来简单,但实验里经常出错,因为记录里常常同时出现 mg/mL、µg/µL、mM、µM 和不同体积单位。
常见错误一:把 mg/mL 当成 mM
同样是 1 mg/mL,分子量不同,对应的摩尔浓度完全不同。
例如一个分子量约 500 g/mol 的小分子,1 mg/mL 大约是 2 mM;如果分子量是 1000 g/mol,同样质量浓度就只有约 1 mM。
所以看到文献或说明书写质量浓度时,不要直接照抄成摩尔浓度。
常见错误二:没有核对盐型和水合物
很多试剂不是游离形式,而是盐酸盐、钠盐、钾盐或水合物。
如果用错分子量,称量质量会系统性偏差,储备液浓度也会偏掉。
建议顺序是:
- 先看当前试剂瓶标签或 COA。
- 再看说明书中的 molecular weight。
- 最后才参考文献或数据库。
如果文献没有写清楚盐型,不要默认和自己手里的试剂完全一致。
常见错误三:mL、µL 和 L 没有统一
配液时最容易把 100 µL、1 mL、100 mL 混在一起。
公式里如果用的是 mM 和 mL,结果才是 mg。如果体积换成了 L 或 µL,结果单位也会跟着变。
实际操作前可以做一次量级检查:
- 配
1 mL储备液,称量通常不会突然到克级。 - 配
100 mL工作液,称量通常会比1 mL放大 100 倍。 - 如果结果和经验差了 1000 倍,优先检查 mL、µL、L 是否写错。
常见错误四:克隆连接只按 ng 配比
载体和插入片段长度不同,同样 50 ng 代表的分子数并不一样。
连接反应更关心分子数比例,而不是单纯质量比例。
如果只按质量配比,可能出现:
- 插入片段分子数不足,载体自连比例高。
- 插入片段过量,出现多拷贝串联插入。
- 每次连接结果波动很大。
做连接、Gibson 组装或标准品配制时,建议先用摩尔量或拷贝数统一口径。
推荐使用顺序
什么时候应该重新核算
出现下面情况时,不建议凭旧记录继续配:
- 换了试剂厂家或货号。
- 试剂从游离形式换成盐型。
- 文献浓度单位和实验记录单位不同。
- 下游实验对浓度很敏感,例如抑制剂处理、标准曲线、克隆连接。
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本文用于科研实验排查与条件优化,不替代实验室 SOP、试剂说明书或医学判断。