先确认胶和槽里的缓冲液一致
核酸琼脂糖电泳常用 TAE 或 TBE。配胶与电泳槽应使用同一类型、同一工作浓度的缓冲液;浓缩液必须先按标签稀释。若误用高倍浓缩液,电流和发热可能升高,迁移与分辨率也会异常。可用Buffer 配制计算复核体积,但具体配方以试剂说明为准。
出现异常时依次核对
- 检查瓶身标签、稀释倍数、配制日期,以及胶液和槽液是否来自同一工作液。
- 观察电泳时是否明显发热、气泡异常或迁移方向错误;必要时换用新鲜工作液重跑对照样本。
- 对照 Marker 与样本:两者都异常时,优先查缓冲液、电压和凝胶;只有样本异常时,再查样本盐分、降解和上样量。
- 按染料说明加入正确比例的 loading buffer。上样时让枪头停在孔口附近,缓慢释放,避免刺穿孔底或把样本冲出孔。
避免一次改太多条件
重跑时保留原样本和 Marker,先只替换可疑缓冲液;若仍异常,再逐项检查胶浓度、装置与上样体积。详细流程见琼脂糖凝胶制备指南。
参考 Thermo Fisher 琼脂糖与电泳缓冲液说明和DNA 电泳操作建议。
相关工具
继续用工具完成条件判断和计算
本文用于科研实验排查与条件优化,不替代实验室 SOP、试剂说明书或医学判断。
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