实验指南

电泳缓冲液和上样条件怎么检查

很多跑胶问题并不来自样品本身,而来自缓冲液配制错误、旧 buffer 重复使用或上样操作不稳定。

作者:BioHelper 团队更新于 2026-09-291 分钟
链接已复制到剪贴板

先确认胶和槽里的缓冲液一致

核酸琼脂糖电泳常用 TAE 或 TBE。配胶与电泳槽应使用同一类型、同一工作浓度的缓冲液;浓缩液必须先按标签稀释。若误用高倍浓缩液,电流和发热可能升高,迁移与分辨率也会异常。可用Buffer 配制计算复核体积,但具体配方以试剂说明为准。

出现异常时依次核对

  1. 检查瓶身标签、稀释倍数、配制日期,以及胶液和槽液是否来自同一工作液。
  2. 观察电泳时是否明显发热、气泡异常或迁移方向错误;必要时换用新鲜工作液重跑对照样本。
  3. 对照 Marker 与样本:两者都异常时,优先查缓冲液、电压和凝胶;只有样本异常时,再查样本盐分、降解和上样量。
  4. 按染料说明加入正确比例的 loading buffer。上样时让枪头停在孔口附近,缓慢释放,避免刺穿孔底或把样本冲出孔。

避免一次改太多条件

重跑时保留原样本和 Marker,先只替换可疑缓冲液;若仍异常,再逐项检查胶浓度、装置与上样体积。详细流程见琼脂糖凝胶制备指南。

参考 Thermo Fisher 琼脂糖与电泳缓冲液说明和DNA 电泳操作建议。

相关工具

继续用工具完成条件判断和计算

Buffer 配制计算

根据目标体积和工作浓度,快速计算 Buffer 原液与补液体积。

立即使用
样品上样量计算

根据目标上样质量或体积,快速反推样品与 loading buffer 的加入量。

立即使用
下一步排查

看完这页后,可以继续确认这些相邻问题

留言与回复

写留言 ↓
正在加载讨论…

不便公开的内容,可使用私密反馈 ↗

本文用于科研实验排查与条件优化,不替代实验室 SOP、试剂说明书或医学判断。