核酸电泳无条带：先排 PCR 还是先排跑胶？

先判断扩增端还是检测端

如果 PCR 阳性对照有产物，但电泳看不到条带，通常优先怀疑跑胶和检测环节；若对照和样本都没有条带，再回到扩增本身。

缓冲液配错、染料失效、胶浓度不合适、样品上样量过少、跑胶电压过高或时间过短，都会让条带难以辨认。

根据目标体积和工作浓度，快速计算 Buffer 原液与补液体积。

根据目标上样质量或体积，快速反推样品与 loading buffer 的加入量。

下一步排查

条带弥散通常和样品质量、上样量、胶浓度以及缓冲液状态有关，需要先判断是样品问题还是分离条件问题。

胶浓度决定了不同片段的分离效果，选错浓度会直接带来条带粘连、跑散或小片段分不开的问题。

很多跑胶问题并不来自样品本身，而来自缓冲液配制错误、旧 buffer 重复使用或上样操作不稳定。

如果 marker 本身就模糊，优先怀疑跑胶体系、染料状态或 marker 保存，而不是直接判断样品失败。

本文用于科研实验排查与条件优化，不替代实验室 SOP、试剂说明书或医学判断。