实验指南

核酸电泳胶浓度怎么选

胶浓度决定了不同片段的分离效果,选错浓度会直接带来条带粘连、跑散或小片段分不开的问题。

作者:BioHelper 团队更新于 2026-09-291 分钟
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先看目标片段大小

琼脂糖比例提高,凝胶孔径通常变小,更有利于分开较短的 DNA 片段;比例降低则便于较大片段迁移。选择时以目标片段和相邻杂带的大小为起点,并核对所用琼脂糖、染料及缓冲液的说明书。

常见目标范围 可先试的琼脂糖比例
约 1–10 kb 0.7%–1.0%
约 0.4–3 kb 1.0%–1.5%
约 0.1–2 kb 1.5%–2.0%

这些只是常规琼脂糖的起始范围,不同产品的分辨率不同。特别短的片段可能需要更高浓度凝胶或聚丙烯酰胺胶;大片段还可能需要低熔点或脉冲场等专门方法。

配胶计算与排查

1%(w/v)表示每 100 mL 最终胶液使用 1 g 琼脂糖;例如 50 mL 的 1.5% 凝胶需要 0.75 g。称量和定容前确认使用的是与电泳槽一致的 1× 工作缓冲液。

若所有条带都挤在一起,先核对目标大小、Marker 规格和胶比例;若条带整体弥散,还应检查样本盐分、上样量、缓冲液、电压和染色,不应只靠提高胶浓度解决。详见琼脂糖凝胶制备指南。

参考 Bio-Rad 水平电泳操作说明和Thermo Fisher DNA 电泳建议。

相关工具

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Buffer 配制计算

根据目标体积和工作浓度,快速计算 Buffer 原液与补液体积。

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样品上样量计算

根据目标上样质量或体积,快速反推样品与 loading buffer 的加入量。

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本文用于科研实验排查与条件优化,不替代实验室 SOP、试剂说明书或医学判断。