什么是 Ct 值：qPCR 术语解释

Ct 值是什么

Ct 值（Cycle threshold，循环阈值）指在 qPCR 反应中，每个循环采集到的荧光信号强度达到预设阈值时所经历的循环数。模板量越多，荧光信号上升越快，Ct 值越小；模板量越少，Ct 值越大。理论上每个循环模板量翻倍，因此 Ct 值每相差 1，对应起始模板量约相差 2 倍（前提是扩增效率为 100%）。

为什么 Ct 值重要

Ct 值是 qPCR 定量分析的核心数据，无论是相对定量（ΔΔCt 法）还是绝对定量（标准曲线法），都依赖它进行样本间比较。在病原检测（如核酸筛查）中，Ct 值还常被直接作为阴阳性判定的参考阈值。

常见误区

1. 跨实验直接比 Ct 值大小：不同仪器、不同批次、不同引物探针组合下的 Ct 值不可直接比较，必须用同一批次的标准曲线或内参校正。
2. Ct 越小越好或越大越无效：仅凭 Ct 不能确定模板过量、检出或定量下限。应结合对照、曲线及本体系验证的动态范围；不设通用 Ct 35/38 分界。
3. 忽略扩增效率：2^-ΔΔCt 有目标与参考检测效率的假设；不能只因效率落入某个宽泛区间就直接使用。按验证结果选择定量模型。

相关工具

• 梯度稀释计算器：制作标准曲线稀释系列。
• 拷贝数计算器：由浓度估算起始模板拷贝数。

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参考资料与适用范围

• Bio-Rad：Reagent Comparison Guide for Real-Time PCR
• Forootan 等：qPCR 检出限与定量限（2017）