快速判断
先确认这 4 件事
先排查的方向
先确认标准曲线本身可信，再判断是模板、引物还是体系造成效率异常。
怎么确认
看各浓度点和重复孔、无模板对照、原始扩增曲线与熔解曲线；RT-qPCR 另查无逆转录对照。
下一步
曲线或对照异常时先重做和记录；曲线可信后，再逐项比较模板稀释、引物与原试剂 SOP。
下次避免
记录每一级稀释、阈值、线性范围和排除点理由，避免只凭单个效率数字判断。
先看标准曲线各点与重复孔、无模板对照和扩增特异性。若曲线或对照不可靠，先重做并记录排除点理由；若曲线可信而效率仍异常，再比较模板稀释是否改善、检查引物和原试剂 SOP。详见逐步排查文章及排查向导。
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本页用于科研实验现象排查，不替代实验室 SOP、试剂说明书或医学判断。