Western blot 内参正常但目的蛋白没有条带怎么办？

内参正常说明流程不一定完全失败，目的蛋白无条带更要回到抗体、蛋白丰度和样品制备。

快速判断

先确认这 4 件事

以下为通用核查起点，不能据此确定原因；请结合下方正文、必要对照和原实验 SOP 判断。

先排查的方向

先确认现象及其出现范围，不要只凭这一条描述归因。

怎么确认

对照同批样本、适用的阳性或阴性对照，以及原始实验记录，找出最早出现差异的步骤。

下一步

记录关键条件，阅读下方与该现象相关的正文，再按所用试剂和设备的原实验 SOP 逐项核查。

下次避免

保留异常现象、批次和处理记录，以便复核与后续比较。

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用 Western blotting 方法文献理解低丰度蛋白检测：上样量、膜选择、抗体、封闭和显色灵敏度如何一起决定信号。

推荐工具

根据目标体积和工作浓度，快速计算 Buffer 原液与补液体积。

根据长度和浓度估算 DNA 或 RNA 的分子拷贝数。

根据 C1V1=C2V2 快速计算原液体积、稀释液体积和最终倍数。

根据目标上样质量或体积，快速反推样品与 loading buffer 的加入量。

根据起始浓度、稀释倍数和步数，快速生成系列稀释方案。

本页用于科研实验现象排查，不替代实验室 SOP、试剂说明书或医学判断。